g215 rPhl p5b Тимофіївка лугова Phleum pratense (1322)

Метод:

   FEIA (Fluoreszenz Enzym Immunoassay/Флуоресцентний імуноферментний аналіз, ImmunoCAP (Імунофлуоресценція на твердій фазі)) – кількісне визначення

Загальна характеристика:

   Phl p 5 — пилковий алерген 5 групи тимофіївки (Phleum pratnese). Алергени пилку трави групи 5 були виявлені в кількох представників підродини Pooidieae. Phlp 5 вважається одним із основних «видоспецифічних алергенів» пилку тимофіївки. Приблизно 65-90% людей, чутливих до пилку трав, у регіонах з помірним кліматом виявляються позитивними на Phl p 5.

Показання для призначення:

• для діагностики алергічних реакцій;
• для оцінки рівня сенсибілізації та ризику розвитку алергічних реакцій;
• контролю ефективності проведеної терапії;
• для оцінки зниження рівня сенсибілізації після виключення контакту з алергеном та проведення терапії;
• з метою оцінки напруженості імунної системи.

Маркер:

   Маркер сенсибілізації до алергенів основних груп

Клінічна значимість:

   Алерген групи 5 тимофіївки має молекулярну масу 28-32 кілодальтон (кДа) і складається з двох ізоформ: групи 5а та групи 5b з широким розкидом епітопів IgE, що може пояснити його високу алергенність. Phl p 5b менший за розміром, ніж 5a, і має молекулярну масу 32 кДа. Варіанти Phl p 5b тимофіївки виявляють розбіжність амінокислотної послідовності на 25-30%.

   Phl p 5b є основною алергенною молекулою пилку тимофіївки завдяки своїм структурним характеристикам, які сприяють активації ефекторних клітин. Він є основною мішенню антитіл IgE у 80-95% пацієнтів з алергією на пилок трав. Виявлено, що дорослі більш чутливі до Phl p 5b порівняно з дітьми. Рекомбінантний Phl p 5b або r Phlp 5b демонструє досить схожість з природним Phl p 5b, а також має гомологію з іншими алергенами групи 5.

   Phl p 5b відповідає за виникнення алергічного риніту (АР) і бронхіальної астми у пацієнтів з алергією на пилок трав. Показано, що Phl p 5b має перехресну реакцію з подібними алергенами групи 5 з кількох видів трав помірного клімату, а також видів зернових.

Біохімія

   Молекулярна маса Phl p 5b становить близько 32 кДа , а аналіз кДНК показує наявність 260-300 амінокислотних залишків у білку. Ізоелектрична точка (pI) алергенів групи 5 тимофіївки коливається від 4,2 до 9 і переважно від нейтральної до кислої. Розрахований pI Phl p 5b становить 5,99. Дослідження показали, що Phl p 5b має рибонуклеазну активність у своєму С-кінцевому домені та може відігравати важливу роль у захисних механізмах .

   Рентгенівська кристалографія та ядерно-магнітно-резонансний спектроскопічний аналіз N-кінцевих і C-кінцевих доменів Phl p 5b показали, що білок утворює складчастий глобулярний домен, що складається з антипаралельного 4-спірального пучка, а структура досить схожа на структура цитохрому с . Phl p 5b є димерним білком; димери з’єднані ковалентно дисульфідним містком, присутнім між двома залишками Cys205. Phl p 5b зазвичай димеризується в розчині.

Ізоформи, епітопи, антитіла

   Згідно з деякими дослідженнями, ізоформи «a» і «b» Phl p 5 є імунологічно порівнянними, тоді як згідно з деякими іншими дослідженнями, дві ізоформи демонструють відмінності як у клітинній, так і в гуморальній імунній відповіді.

   Картування епітопів виявило епітопи IgE, що належать до N-кінцевого домену Phl p 5b. Крім того, епітопи також були ідентифіковані в С-кінцевому домені алергену. Більшість Phl p 5-специфічних епітопів IgE є конформаційними . Зв’язування багатьох IgE з декількома незалежними епітопами Phl p 5b і їх тісний зв’язок з антигеном пояснюють його високий алергенний потенціал.

Перехресна реактивність

   Було виявлено, що рекомбінантний Fab IgE людини сильно перехресно реагує з Phl p 5 та іншим природним алергеном групи 5 з різних видів трави та кукурудзи, що вказує на те, що рекомбінантний Fab IgE людини здатний ідентифікувати перехресно реактивний епітоп у алергенах групи 5 з різних трави та види кукурудзи . Фактично, Phl p 5 демонструє перехресну реактивність з іншими алергенами групи 5 підродини Pooideae трав помірного поясу, а також видів кукурудзи. Phl p 5 не виявляє перехресної реактивності з пилком однодольних.

Правила підготовки пацієнта:

   Вранці, натщесерце (можна пити чисту негазовану воду) або через 4 години після останнього прийому їжі, не курити протягом 30 хвилин до аналізу. Дітям до 1 року не приймати їжу протягом 30-40 хвилин до дослідження. Дітям віком від 1 до 5 років не вживати їжі протягом 2-3 годин до дослідження.

Транспортування:

   У замороженому вигляді (-20 ° С), не допускаючи розморожування