Батьківство: стандартний тест з трьома особами (батько + мати + 1 дитина) (0887)

Метод:

Мікросателітний аналіз.

Загальна характеристика:

Встановлення батьківства означає доказ генетичними методами те, що передбачуваний батько дитини доводиться йому біологічним батьком.

Показання для призначення:

• Встановлення батьківства
• Встановлення спорідненості

Маркер:

Генетичний маркер спорідненості

Клінічна значимість:

ДНК-аналіз має на увазі безпосереднє вивчення генетичного матеріалу, який дитина успадковує від своїх біологічних батьків, виходячи з теорії спадковості Менделя.

Кожна хромосома складається з ДНК, що є унікальною для кожної людини послідовністю нуклеотидів – генетичний код. У послідовності ДНК є багато високополіморфних ділянок (локусів) – коротких тандемних повторів (short tandem repeat, STR). Це повтори двох або більше пар нуклеотидів, що безпосередньо примикають один до одного. Довжина короткого тандемного повтору зазвичай становить від 2 до 10 пар основ (наприклад, (CATG) n), і кількість повторів у локусі дуже індивідуальна. Для встановлення спорідненості використовується дослідження кількості STR-повторів у локусі. Виявлені варіанти (алелі) порівнюються, і таким чином можна визначити, що одна алель дісталася дитині від матері, а друга від батька. Якщо алель дитини не збігається з жодною з двох алелей батька, біологічне батьківство повністю виключається. Також враховується ймовірність розходження алелей через мутацію (для STR-локусів ймовірність її виникнення становить від 0,1 до 0,4 %).

Сучасні методи дослідження ДНК дозволяють встановити спорідненість, аналізуючи STR-послідовності ядерної ДНК та статевих хромосом, а також послідовність нуклеотидів у мітохондріальній ДНК (для встановлення спорідненості по жіночій лінії). У геномі дитини можуть бути тільки такі алелі поліморфних локусів, які виявляються у матері та біологічного батька. Тому якщо у дитини та батька виявляється збіг як мінімум по одному алелю у кожному досліджуваному локусі, можна з ймовірністю 99,75-99,99% підтвердити батьківство. Для досягнення такої точності досліджується від 16 до 20 різних локусів. За відповіді “не є біологічним батьком” точність тесту 100 %.

При аналізі трьох зразків (мати, дитина, гаданий батько) гарантується мінімальне значення ймовірності батьківства 99,9%. За відсутності матері (досліджуються лише зразки батька та дитини) мінімальне гарантоване значення дещо менше – 99,75 %. Тобто помилка можлива лише в одному випадку з 10 000. Негативна відповідь точна на 100%.

Правила підготовки пацієнта:

За годину до взяття слини не їсти, не палити, не чистити зуби. Можна пити воду, від інших напоїв краще утриматися. Перед збором прополощіть рот звичайною водою. При взятті зразка у немовляти почекайте як мінімум півгодини з моменту останнього годування. Безпосередньо перед взяттям зразка дайте йому попити теплої води з пляшечки для годування.

Інструкція по забору матеріалу:

1. Підпишіть конверти для кожного учасника, вказавши необхідні дані  за зразком.
2. Одягніть рукавички (по можливості), розкрийте упаковку зі спеціальними паличками, витягніть 2 шт. з конверта не торкаючись до ваті на паличці.  Проведіть по внутрішній стороні щоки при цьому обертаючи її навколо своєї осі  і намагаючись охопити всю поверхню внутрішньої сторони щоки 15-20 раз.
3. Покладіть зразок в  відповідний підписаний конверт. Не можна замість конверта використовувати пластиковий пакет або контейнер, оскільки це порушує вільну циркуляцію повітря і призведе до псування зразків.
4. Повторіть процедуру для другої палички.
5. Заклейте конверт з 2 паличками  для одного учасника.
6. Покладіть конверт в темне сухе місце і залиште просушитися на 15 хвилин. Не можна класти конверт під прямі сонячні промені, використовувати фен або інші прилади.
7. Повторіть процедуру для другого учасника. Уникайте контакту підсихаючих конвертів, інакше ДНК може змішатися.

Умови доставки в лабораторію:

У спец. наборі: підписаному  конверті на кожного учасника, при кімнатній температурі до 48 годин.

Умови доставки в Німецьку лабораторію:

У спец. наборі: підписаному конверті на кожного учасника, при кімнатній температурі до 48 годин.

Референтні значення:

Батьківство/материнство виключається зі 100% ймовірністю, а підтверджується з 99,9999%.